При выполнении сине-белого экрана белые колонии бактерий содержат?
При выполнении сине-белого экрана белые колонии бактерий содержат?

Видео: При выполнении сине-белого экрана белые колонии бактерий содержат?

Видео: При выполнении сине-белого экрана белые колонии бактерий содержат?
Видео: Как вырастить колонию бактерий за несколько дней 2024, Ноябрь
Anonim

И наоборот, белые колонии не может метаболизировать X-Gal для производства синий цвет, потому что они не продуцируют функциональную β-галактозидазу после захвата плазмиды, несущей встроенную ДНК, и разрушения гена lacZ α. Эти белые колонии содержат рекомбинантный бактерии и должен быть выбран (Рисунок 1).

Таким образом, все ли белые и синие колонии содержат плазмиду?

В синие колонии содержат "Сам" религиозный плазмиды что делать не иметь вставок ДНК, прерывающих ген lac Z. Белые колонии состоят из бактерий, переносящих плазмиды которые имеют фрагменты вставки ДНК, которые прерывают ген lac Z. Подбор будет производиться на ампициллин. содержащий Средняя.

Точно так же, какова цель сине-белого экрана? В синий – белый экран скрининг метод, который позволяет быстро и удобно обнаруживать рекомбинантные бактерии в экспериментах по векторному молекулярному клонированию. Интересующая ДНК лигируется в вектор.

Учитывая это, что такое скрининг сине-белых колоний?

В синий - белый экран это скрининг метод, который позволяет обнаруживать успешные лигирования при клонировании генов на основе вектора. Интересующая ДНК лигируется в вектор. Если перевязка прошла успешно, бактериальный колония будет белый ; если нет, то колония будет синий.

Почему одни колонии синие, а другие белые?

Любой колония содержащий плазмиду (и, следовательно, функционирующий ген β-галактозидазы) превратится синий , результат активности β-галактозидазы. Это называется α-дополнением. Вставка разрушила ген β-галактозидазы, и поэтому эти колонии оставаться белый.

Рекомендуемые: