Как работает клонирование Гибсона?
Как работает клонирование Гибсона?

Видео: Как работает клонирование Гибсона?

Видео: Как работает клонирование Гибсона?
Видео: Почему нельзя клонировать человека 2024, Ноябрь
Anonim

В Клонирование Гибсона Мастер-микс состоит из трех разных ферментов в одном буфере. Каждый фермент выполняет специфическую и уникальную функцию для реакции: экзонуклеаза Т5 - создает 3'-выступающие части однонитевой ДНК, отщепляя 5'-конец ДНК. Комплементарные фрагменты ДНК могут впоследствии отжигаться друг с другом.

Учитывая это, как работает Гибсон?

В Гибсон Метод Assembly® - это процедура клонирования, которая позволяет клонировать два или более фрагментов без необходимости переваривания рестрикционными ферментами или совместимых сайтов рестрикции. Вместо этого в фрагменты включаются определяемые пользователем перекрывающиеся концы, чтобы обеспечить бесшовное соединение смежных фрагментов.

Точно так же, что входит в состав Gibson Assembly Master Mix? В Мастер-микс для клонирования Gibson состоит из трех разных ферментов в одном буфере. Каждый фермент выполняет определенную и уникальную функцию для реакции: экзонуклеаза Т5 - создает 3'-выступающие части однонитевой ДНК, отщепляя 5'-конец ДНК. Комплементарные фрагменты ДНК могут впоследствии отжигаться друг с другом.

Таким образом, как работает сборка Golden Gate?

Золотые ворота клонирование или Сборка Golden Gate есть метод молекулярного клонирования, который позволяет исследователю одновременно и направленно собирать несколько фрагментов ДНК в одну часть с использованием рестрикционных ферментов типа II и ДНК-лигазы Т4. Этот сборка выполняется in vitro.

Как работает клонирование шлюза?

В GATEWAY Клонирование Технология основана на системе сайт-специфической рекомбинации, используемой фагом 1 для интеграции своей ДНК в E. Сайты attL и attR, окружающие вставленную ДНК фага, рекомбинируют сайт-специфично во время операции вырезания, чтобы преобразовать сайт attP в фаге 1 и attB в каталоге E.

Рекомендуемые: