Оглавление:

Как вставить ген в плазмиду?
Как вставить ген в плазмиду?

Видео: Как вставить ген в плазмиду?

Видео: Как вставить ген в плазмиду?
Видео: Агробактерии сегодня 2024, Ноябрь
Anonim

Основные шаги:

  1. Разрезать плазмида и "вставить" в ген . Этот процесс основан на рестрикционных ферментах (которые разрезают ДНК) и ДНК-лигазе (которая присоединяется к ДНК).
  2. Вставлять в плазмида в бактерии.
  3. Вырасти много плазмида - разносят бактерии и используют их как «фабрики» для производства белка.

Кроме того, как можно вставить ген в плазмиду GCSE?

это вставлен в плазмиду с использованием ферментов лигазы. в плазмида идет в бактериальная клетка. трансгенная бактерия размножается, в результате чего в миллионы идентичных бактерий, производящих человеческий инсулин.

Кроме того, как сделать субклонирование гена? Основные шаги для Субклонирование Вы освобождаете и очищаете свою вставку из родительского вектора, лигируете эту вставку в подготовленный вектор-адресат, трансформируете эту реакцию лигирования в компетентные бактериальные клетки. Затем вы просматриваете преобразованные ячейки для вставки.

Учитывая это, каковы 4 этапа клонирования гена?

В классических протоколах клонирования рестрикционными ферментами и лигирования клонирование любого фрагмента ДНК по существу включает четыре этапа:

  • выделение интересующей ДНК (или целевой ДНК),
  • перевязка
  • трансфекция (или трансформация), и.
  • процедура проверки / отбора.

Как усилить плазмиду?

Экспериментальная процедура

  1. Запустите ПЦР и очистите продукт ПЦР: Запустите ПЦР для амплификации вставки ДНК.
  2. Переваривайте свою ДНК:
  3. Изолируйте вставку и вектор с помощью очистки геля:
  4. Свяжите вставку с вектором:
  5. Преобразование:
  6. Изолируйте готовую плазмиду:
  7. Проверьте свою плазмиду секвенированием:

Рекомендуемые: