Почему не действует рестрикционный фермент?
Почему не действует рестрикционный фермент?

Видео: Почему не действует рестрикционный фермент?

Видео: Почему не действует рестрикционный фермент?
Видео: CTRL+V для ДНК: рестрикция и лигирование. Курс "ГМО: технологии создания и применение" 2024, Ноябрь
Anonim

Может быть несколько разных причин, по которым ваш рестрикционный фермент не режет ДНК, как показано в этом видео. Подготовка ДНК к расщеплению должен не содержать загрязняющих веществ, таких как фенол, хлороформ, спирт, EDTA, детергенты или избыточные соли, все из которых могут влиять на рестрикционный фермент деятельность.

В связи с этим, почему рестрикционные ферменты не разрезают бактериальную ДНК?

Бактерии имеют рестрикционные ферменты , также называемый эндонуклеазы рестрикции , который резать двухцепочечный ДНК в определенных точках на фрагменты. Интересно, рестрикционные ферменты не рассекайте свои собственные ДНК . Бактерии предотвратить их собственное ДНК от рубить рестрикционный фермент через метилирование ограничение места.

Можно также спросить, а где режут рестрикционные ферменты? Рестрикционный фермент Типы Как правило, Тип I ферменты режут ДНК в местах, удаленных от последовательности распознавания; Тип II резать ДНК в пределах или рядом с последовательностью распознавания; Тип III резать ДНК, близкие к узнаваемым последовательностям; и Тип IV расщепляет метилированную ДНК.

Точно так же спрашивают, что произойдет, если вы добавите слишком много рестрикционного фермента?

Может произойти неполное пищеварение когда слишком много или тоже маленький фермент используется. В наличие загрязняющих веществ в в Образец ДНК жестяная банка подавлять ферменты , что также приводит к неполному пищеварению. Некоторые рестрикционные ферменты требуются кофакторы для полной активности.

Почему мой дайджест ограничений не работает?

Неполный или нет пищеварение из-за активности фермента, блокированного метилированием ДНК. Если ваш фермент активен и переваривает контролировать ДНК и в реакция настраивается с использованием оптимальных условий, но вы все равно видите вопросы с участием пищеварение , это может быть потому, что в фермент ингибируется метилированием в матричная ДНК.

Рекомендуемые: