Оглавление:

Как подбирать клонов?
Как подбирать клонов?

Видео: Как подбирать клонов?

Видео: Как подбирать клонов?
Видео: Играй как ПРО: Контроль иллюзий 2024, Ноябрь
Anonim

Когда выбор а клон убедитесь, что корни крепкие, белые и стремительно выступают из среды выращивания. Если корни коричневые и сморщенные или кажутся неактивными по другим причинам, положите их обратно и поищите лучший.

Кроме того, как клонировать отдельную клетку?

  1. Подсчитайте клетки, чтобы поместить ~ 16 000 клеток в первую лунку (A1) 96-луночного планшета, содержащего 200 мкл среды.
  2. Удалите 100 мкл из клеток, содержащих A1, и смешайте с B1, пипетируя вверх и вниз 3 раза, чтобы хорошо перемешать, прежде чем удалить 100 мкл и смешать с C1 и т. Д.

Кроме того, как выбрать колонию клеток млекопитающих? Поместите пластину под микроскоп, чтобы выбрать недифференцированное здоровое колонии . Выберите колонии с помощью пипетки П-20 установить на 10 мкл. Осторожно выбирать а колония не разбивая колония в одиночный клетки , и перенесите его в 96-луночный планшет с трипсином. Пипеткой вверх и вниз пару раз разогнать колония.

Соответственно, как использовать цилиндр для клонирования?

С использованием стерильные средние щипцы, возьмите клонирующий цилиндр . Осторожно нажмите на плоскую нижнюю часть цилиндр в гладкую силиконовую смазку и удалите резким вертикальным движением. Если все сделано правильно, это обеспечит равномерное распределение смазки по нижней части цилиндр . Установить цилиндр над колонией.

Как выбрать колонии для стабильных клеточных линий?

Протокол создания стабильных клеточных линий требует нескольких шагов, как показано ниже:

  1. Создайте кривую уничтожения, чтобы определить оптимальную концентрацию антибиотика для выбора.
  2. Трансфекция клеток желаемой плазмидной конструкцией (ами)
  3. Выберите и увеличьте стабильные поликлональные колонии.
  4. Идентифицируйте отдельные клоны путем ограниченного разведения и увеличения.

Рекомендуемые: