Как используются рестрикционные ферменты при проведении гель-электрофореза?
Как используются рестрикционные ферменты при проведении гель-электрофореза?

Видео: Как используются рестрикционные ферменты при проведении гель-электрофореза?

Видео: Как используются рестрикционные ферменты при проведении гель-электрофореза?
Видео: Методы молекулярной биологии. Электрофорез в агарозном геле 2024, Ноябрь
Anonim

1 ответ. Чтобы разрезать ДНК, РНК или плазмиду на ограничение сайтов (таких как EcoRI, BamHI, hindIII и BglII) для создания меньших генетических фрагментов, которые могут быть разделены и, таким образом, охарактеризованы с использованием гель-электрофорез.

Точно так же можно спросить, какова роль рестрикционных ферментов?

А рестрикционный фермент представляет собой белок, который распознает конкретную короткую нуклеотидную последовательность и разрезает ДНК только на этом конкретном участке, который известен как ограничение сайт или последовательность-мишень. В живых бактериях рестрикционные ферменты функционируют для защиты клетки от вторжения вирусных бактериофагов.

Кроме того, как узнать, какой рестрикционный фермент использовать? При выборе рестрикционных ферментов вы хотите выбрать ферменты, которые:

  1. Обложите пластину по бокам, но не врежьте ее.
  2. Находятся в желаемом месте в плазмиде-реципиенте (обычно в сайте множественного клонирования (MCS)), но не разрезаются где-либо еще на плазмиде.

Кроме того, как рестрикционные ферменты используются в исследованиях?

В лаборатории рестрикционные ферменты (или эндонуклеазы рестрикции ) находятся использовал разрезать ДНК на более мелкие фрагменты. Разрезы всегда делаются по определенным нуклеотидным последовательностям. Другой рестрикционные ферменты распознавать и вырезать различные последовательности ДНК.

Какова роль гель-электрофореза?

Гель-электрофорез это метод, используемый для разделения фрагментов ДНК по размеру. Образцы ДНК загружают в лунки (углубления) на одном конце гель , и электрический ток протягивает их через гель . Фрагменты ДНК заряжены отрицательно, поэтому они движутся к положительному электроду.

Рекомендуемые: